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高效液相色譜儀測(cè)定甘蔗中三種水溶性糖含量

www.help-services.cn  2019-11-17 09:38  

甘蔗是我國(guó)***重要的糖料作物,靈極客它不僅是食糖業(yè)的重要原料,而且是能源、化工、釀酒和飼料的原料。甘蔗節(jié)間含有大量的糖分,主要有葡萄糖、果糖和蔗糖這三種糖類碳水化合物。無(wú)論是感官還是研究表明,甘蔗在不同生長(zhǎng)時(shí)期、不同節(jié)間糖分含量存在較大差異。因此分析測(cè)定甘蔗不同時(shí)期、不同節(jié)間糖含量,分析多種糖分生長(zhǎng)積累的規(guī)律,進(jìn)而運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析的方法了解蔗糖分積累與糖代謝相關(guān)酶活性變化之間的關(guān)系,從生長(zhǎng)機(jī)理各個(gè)方面探討研究甘蔗生長(zhǎng)過(guò)程和糖分積累的規(guī)律,并為甘蔗高產(chǎn)高糖栽培及遺傳改良等提供理論上的依據(jù)。

糖含量的測(cè)定方法有化學(xué)比色法、旋光法、氣相色譜法和液相色譜法。一般化學(xué)法只能測(cè)定各種糖的總量而不能分別測(cè)定各種糖的含量,并且有研究表明,測(cè)得的葡萄糖、果糖值比實(shí)際值略高而存在偏差,極有可能影響甘蔗品質(zhì)的判斷。氣相色譜法雖可分別測(cè)定不同糖的含量,靈敏度高,但是由于糖類化合物沸點(diǎn)高,難以汽化,必須進(jìn)行衍生化反應(yīng)才可檢測(cè),樣品處理、分析檢測(cè)步驟較為繁瑣,且認(rèn)為干擾誤差較大。山東魯創(chuàng)分析儀器有限公司色譜實(shí)驗(yàn)室,采用本公司生產(chǎn)的LC-3000高效液相色譜儀分析檢測(cè)蜂蜜、菠蘿、馬鈴薯等中不同糖類碳水化合物含量,已在實(shí)際應(yīng)用中取得良好的分析效果,得到客戶的肯定。目前,精英家教網(wǎng)甘蔗節(jié)間糖類碳水化合物含量測(cè)定目前報(bào)道主要采用一般的化學(xué)方法。魯創(chuàng)分析儀器公司充分吸收國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究方案,對(duì)分析條件進(jìn)一步優(yōu)化,采用碳水化合物分析專用色譜柱對(duì)甘蔗節(jié)間糖分進(jìn)行分離分析,建立一種簡(jiǎn)便、快速和準(zhǔn)確可靠的,能同時(shí)測(cè)定果糖、葡萄糖、蔗糖含量的高效液相色譜儀分離法。

1.儀器與試劑

高效液相色譜儀LC-3000(魯創(chuàng)儀器),示差折光檢測(cè)器,熔火前線的攻勢(shì)針孔進(jìn)樣器。葡萄糖、果糖、蔗糖標(biāo)樣為國(guó)產(chǎn)色譜純(純度均不低于99.5%),乙腈為色譜純,實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

2.色譜分析條件

色譜柱:Agilent Zorbax carbohydrate柱(4.6mm×250mm,5.0μm),流動(dòng)相為乙腈-水(75:25,V/V),柱溫30℃,檢測(cè)池溫度35℃,流速1.0mL/min,進(jìn)樣量20μL。

3.糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取果糖、葡萄糖、蔗糖各2.0g(精確到0.0001g),極速輪滑官網(wǎng)轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用高純水定容至刻度,得到各自質(zhì)量濃度均為20mg/mL的混標(biāo)溶液。逐級(jí)稀釋至10、5、2.5、1.25、0.625mg/mL。上機(jī)進(jìn)樣分析前經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾。每個(gè)樣品重復(fù)3次。

4.樣品處理

將冷凍的節(jié)間樣品去皮,切碎,在液氮中磨成粉末狀,精確稱取樣品粉末1.00g(精確到0.0001g),加入80%的乙醇5mL,80℃恒溫水浴30min后,12000r/min離心20min,取上清液,殘?jiān)尤?mL 80%的乙醇溶液重復(fù)提取1次,預(yù)言者褶裙合并提取上清液,90℃水浴中蒸干乙醇,加入高純水定容至5mL,混勻后用一次性注射器抽取提取樣液,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后以備上機(jī)進(jìn)樣分析。每個(gè)樣品重復(fù)3次。

魯創(chuàng)分析結(jié)果表明,采用高效液相色譜儀分析甘蔗節(jié)間果糖、葡萄糖、蔗糖,保留時(shí)間重現(xiàn)性好,三者的含量和峰面積比值之間呈良好的線性關(guān)系,預(yù)言者褶裙相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較好,加標(biāo)回收率準(zhǔn)確度較高,是一種檢測(cè)分析甘蔗節(jié)間糖分組成和含量的簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的方法。如有相關(guān)分析需求請(qǐng)與山東魯創(chuàng)分析儀器有限公司0632-5080618聯(lián)系,亦可登錄公司網(wǎng)站http://www.sdlcyq.com在線即時(shí)了解咨詢。

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