1實(shí)驗(yàn)部分
　　
　　青霉素通過(guò)青霉素酶作用，可以生成青霉素噻唑酸，其反應(yīng)過(guò)程如下：

　　
　　該酸可以電離產(chǎn)生H ，是一種強(qiáng)酸，所以酶催化反應(yīng)的速率可以通過(guò)酸度的變化來(lái)表示，這樣根據(jù)米恰利-門(mén)頓反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程：

　　
　　酵催化反應(yīng)速率與酶和底物有關(guān)，當(dāng)?shù)孜锏臐舛萚S]很大時(shí)，反應(yīng)速率與[S]無(wú)關(guān)，而只與酶的總濃度成正比，這樣就可以通過(guò)酸度的變化來(lái)測(cè)定酶的濃度．為了找出最佳測(cè)試條件，我們選擇了酶催化適宜溫度，底物濃度受緩沖容量。其中，空白為不加酶的PBS，這樣可以對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的其他一些干擾因素進(jìn)行相關(guān)扣除，以PBS為溶劑配置不同濃度的青霉素酶溶液，做前期定性實(shí)驗(yàn)，然后用脫脂奶粉配成牛奶溶液，經(jīng)過(guò)等效巴氏消毒后，做青霉素分解實(shí)驗(yàn)．(以下數(shù)據(jù)均扣除了空白)。
　　
　　2結(jié)果分析與討論
　　
　　2.1選取緩沖容量
　　
　　這里選擇一定緩沖量的溶液來(lái)模擬，是考慮到了牛奶本身具有一定緩沖能力。最終選取0.025mol/L,PH7.0的PBS溶液。
　　
　　2.2最適溫度的選擇
　　
　　比較不同溫度對(duì)酶活的影響，最終選擇25℃的最適溫度，來(lái)進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)工作。
　　
　　2.3底物的藏度溶選擇
　　
　　用PBS配制維度為10，15，20，25，西邊的風(fēng)美腳30，35mg/ml的青霉素溶液，分別加入50IU/ml的青霉素酶，反應(yīng)30min后，得到變化曲線。
　　
　　根據(jù)米恰利-門(mén)頓原理，當(dāng)?shù)孜餄舛茸銐虼髸r(shí)，酶的催化作用速率與底物濃度無(wú)關(guān)�？梢钥闯觯�隨著青霉素底物的濃度的增大，當(dāng)青霉素酶的濃度一定時(shí)，相應(yīng)的酶催化的反應(yīng)速率也隨之增加，而當(dāng)青霉素的濃度達(dá)到20mg/ml時(shí)，反應(yīng)速率基本達(dá)到最大值。為得到穩(wěn)定效果，最終選擇青霉素底物的濃度為25mg/m1。
　　
　　2.4工作曲線的測(cè)定
　　
　　可以看出，在PBS配制的青霉素溶液中，加入青霉素酶，pH值隨時(shí)間增加而下降。由?pH=pH30min-pH0min得到圖1，從圖1看出：對(duì)于酶催化的速率來(lái)說(shuō)，與酶的總濃度成比例關(guān)系，當(dāng)增加青霉素酶濃度后，青霉素分解的反應(yīng)速率加快。在10-5050IU/ml范圍之間，西邊的風(fēng)美腳呈線性關(guān)系。隨著青霉素酶濃度的增加，最低檢出限為10IU/ml。

　　
　　從用牛奶配制的青霉素溶液，加入不同濃度的青霉素酶反應(yīng)過(guò)程的pH值中可以看出，對(duì)于溶劑為牛奶的情況來(lái)說(shuō)，PBS相似的變化特征也相應(yīng)呈現(xiàn)出來(lái)：只要增加青霉素酶濃度，青霉素分解的反應(yīng)速率加快，其中，?pH=pH30min-pH0min。圖2為在不同濃度下青霉素酶作用下牛奶溶液的?pH值，從圖中可以看出，當(dāng)不斷增大青霉素酶濃度以后，同樣的，增大?pH也成為必然，這樣也呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，其中，8IU/ml為最低檢出限。

　　3結(jié)論
　　
　　當(dāng)?shù)孜锏臐舛群艽髸r(shí)，反應(yīng)速率與底物無(wú)關(guān)，本實(shí)驗(yàn)選用25mg/ml濃度青霉素作為底物。當(dāng)隨著青霉素酶濃度的增加，分解青霉素的速度加快，pH變化增大。在標(biāo)準(zhǔn)奶樣的檢測(cè)中，最低檢出限達(dá)到8IU/ml，下一步增加取點(diǎn)密度，繪制檢測(cè)工作曲線，用于實(shí)際奶樣的檢測(cè)。

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